1α,25（OH）2D3对不同分化阶段成骨细胞RANKL及OPG基因表达的影响

摘要

目的研究高剂量1α,25(OH)2D3对RANKL/OPG表达的调控是否随成骨细胞(osteoblasts,OB)分化成熟而变化。方法体外诱导MC3T3-E1细胞成骨分化,并分别于成骨诱导第0、7、14、21、28 d向细胞加以1α,25(OH)2D3(10 nM)的刺激,4 h后提取细胞总RNA,进行RT-PCR检测OB RANKL及OPG mRNA表达水平。对照组则以无水乙醇刺激。同时,对不同分化阶段OB进行茜素红染色,以检测钙结节的形成。结果在OB分化过程中,对照组RANKL表达无显著变化;OPG基因表达逐渐增多,在第14天达最高水平,之后逐渐下降;RANKL/OPG比值始终低于未成骨诱导时的RANKL/OPG比值。1α,25(OH)2D3持续促进RANKL基因的表达,并且持续抑制OPG基因表达;实验组RANKL/OPG比值一直高于对照组,尤其在矿化阶段,差异有统计学意义。结论 1α,25(OH)2D3对RANKL和OPG的调控随OB分化成熟而变化。

关键词